如今檢查ELISA有很多路徑，咱們能夠依據(jù)自個(gè)的偏好進(jìn)行挑選。一般ELISA檢查的是酶促反響的可溶性產(chǎn)品，抗體上聯(lián)絡(luò)有相應(yīng)的酶（例如一般運(yùn)用的辣根過(guò)氧化物酶HRP），而反響系統(tǒng)中添加有相應(yīng)的底物（如3，3-二氨基聯(lián)苯胺DAB）。
ELISA試劑盒雖然有多種類(lèi)型，不過(guò)它們都有一個(gè)一同特征，就是進(jìn)行抗原捕獲。
一般捕獲辦法包含將抗原吸附到微孔板或許用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。
In-cell ELISA和酶聯(lián)免疫斑駁ELISPOT是兩種分外的類(lèi)型，In-cell ELISA需求將微孔板中培育的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化，然后再用抗體原位檢查。ELISPOT有點(diǎn)像蛋白印跡Western blot，先在帶膜的微孔板中培育細(xì)胞，然后在膜上檢查細(xì)胞分泌的抗原構(gòu)成斑駁。
這種酶促反響生成具有特征性的色彩，能夠通過(guò)分光光度計(jì)進(jìn)行檢查，堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。
ELISA試劑盒在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢查時(shí)，檢查用的二抗有必要特異性對(duì)于檢查一抗，而不能與捕獲抗體起反響。
假設(shè)檢查用二抗與捕獲抗體聯(lián)絡(luò)，試驗(yàn)特異性就會(huì)大打折扣。
一般咱們選用源自不一樣宿主的捕獲抗體和檢查一抗，來(lái)避免上述疑問(wèn)。
酶能夠聯(lián)絡(luò)在一抗上，也能夠聯(lián)絡(luò)在二抗上，還能夠運(yùn)用鏈霉親和素符號(hào)的酶與親和素符號(hào)的一抗聯(lián)絡(luò)。此外ELISA的作用檢查還包含放射性檢查、熒光檢查、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢查等。
單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA試劑盒，ELISA試劑盒實(shí)際上有時(shí)候二者聯(lián)絡(luò)作用非常好。例如，對(duì)于雙抗夾心法而言，用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢查有時(shí)更有幫助。
多抗能夠保證捕獲悉數(shù)抗原，隨后單抗再特異性檢查具有特定抗原表位的抗原。
假設(shè)抗體間發(fā)作沖突或穿插反響就會(huì)影響悉數(shù)試驗(yàn)的特異性。
ELISA試劑盒其間抗體來(lái)歷所帶來(lái)的兼容性就是穿插反響的一個(gè)要素。雖然如今收買(mǎi)源自動(dòng)物的抗體越來(lái)越簡(jiǎn)略，咱們?nèi)杂斜匾┱J(rèn)一下是不是會(huì)發(fā)作穿插反響的疑問(wèn)。
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